Huérfano desde pequeño, Peter Parker (Tobey Maguire) vive en Queens, Nueva York, con su tía May y su Tío Ben. Es un estudiante como tantos otros, mientras trabaja como fotógrafo en el diario Bugle bajo la tutela del editor J. Jonah Jameson. Completando su círculo íntimo, sufre por la hermosa Mary Jane Watson y suele divertirse con su amigote Harry Osborn. En un viaje de estudios, en el que Peter y sus compañeros recibe una demostración científica sobre arañas, Peter es mordido por una araña genéticamente alterada. Pronto descubre que tiene poderes fuera de lo común: está dotado de la fuerza y agilidad de una araña además de tener un agudo "sentido arácnido". Tras la muerte de su tío a manos de un ladón, Peter decide usar sus poderes extraordinarios para combatir el crimen.